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原核蛋白表达服务
原核表达纯化是一种利用E.coli系统通过基因克隆技术，将外源目的基因构建到原核表达载体中，并导入到表达菌株中，使其在大肠杆菌中高效表达和纯化目的蛋白的技术。E.coli具有生长速度快、表达周期短、表达量高、成本低等特点，是目前的表达系统之一。鸿蒙生物拥有丰富原核表达纯化经验，可以提供从序列评估、基因合成/转载体到蛋白表达纯化的一站式服务，满足客户不同种类的需求。
服务优势
基于独特的标签系统，可以制备无标签的重组蛋白，适用于动物免疫
丰富的蛋白纯化经验，不同的亲和标签选择，可以获得高质量的目的蛋白
成熟的包涵体复性技术，提高重组蛋白的成功率
原核蛋白表达纯化服务流程
需求沟通
签订合同
原核蛋白表达纯化
质量控制
分装发货
原核蛋白表达纯化定制
| 阶段 | 服务内容 | 周期(天) | 备注 |
|---|---|---|---|
| 阶段1 | 转载体/基因合成 | 7-10 | 客户提供模板/基因序列，本公司提供表达载体。 |
| 阶段2 | 小量表达分析蛋白可溶性 | 3-4 | 质粒转化，50ml 小体积表达，电泳检测，分析表达量，如蛋白可溶提供 20μg蛋白。 |
| 阶段3 | 放大表达 | 14-21 | 根据小试结果进行大体积放大制备。 |
起始样本：
1.目的基因序列信息。
2.目的基因模板质粒：提供1-5μg质粒，抗性信息。
3.目的基因模板新鲜菌液/甘油菌：确保菌的活性、无污染，抗性信息。
案例展示
蛋白原核表达后多步骤纯化得到含有sumo标签的蛋白，再通过sumo蛋白酶去除标签后得到无标签的蛋白，SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白纯度≥95%。
图1.蛋白含sumo标签的SDS-PAGE 图2.蛋白去除sumo标签的SDS-PAGE
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