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杂交瘤细胞测序服务
杂交瘤抗体测序技术是通过高通量测序和生物信息学分析，准确鉴定杂交瘤细胞中编码抗体的重链和轻链序列。此服务广泛应用于试剂抗体和药物抗体的开发、抗体功能研究及制备单克隆抗体。
服务优势
高灵敏度：可精准识别稀有变异，确保抗体序列的正确性。
快速交付：从样本到序列结果的周期短。
全面性：提供重链和轻链的完全可变区序列，并可选提供恒定区序列。
杂交瘤测序服务流程
RNA提取
RT-PCR获得重轻链基因
载体构建
测序验证
杂交瘤测序服务
| 服务内容 | 周期 | 交付 |
|---|---|---|
| RNA提取 | 1天 | 细胞株测序项目报告 |
| 反转录，PCR扩增重链及轻链序列 | 2天 | |
| 载体构建 | 2天 | |
| 测序验证 | 3天 |
备注：
样本类型
1. 杂交瘤细胞：新鲜或冻存细胞，数量 > 1×10⁶ 。
2. 总RNA：浓度 ≥ 100 ng/μL，OD260/280 值在1.8~2.0之间。
3. cDNA：提供的cDNA浓度 ≥ 20 ng/μL。
运输与保存
1. 细胞样本：使用干冰运输。
2. RNA/cDNA样本：使用RNase-free管装载，并放置于冰袋或干冰中运输。
案例展示
经自主开发的小鼠杂交瘤细胞，经小鼠重链和轻链PCR扩增后，条带大小正确。
图1.小鼠重链PCR扩增电泳图 图2.小鼠轻链PCR扩增电泳图
小鼠重链和轻链PCR扩增产物，构建质粒，经Sanger测序，获得重链和轻链的可变区序列。
图3.Sanger测序峰图
| 重链基因可变区 |
| CLVTFPSCILSQVQLRESGPGLVAPSQSLSITCHVSGFSLPGYGITWVHQPTGKGMEWLGMIWSDGITDYNSALKCSLSITKNYSKSHDLLKMTCLHSDDTARRLCSRAGIYFYGSSFPPIVYWGQGITLTVSSAKTTPPSVYPLPPGSV |
| 轻链基因可变区 |
| CVTAGVHSEIQMTQSPASLSVSVGETVTITCRASDNVYSNLAWYQQKQGKSPQLLVYGATNLADGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDFGSYYCQHFWNTIFTFGSGTKLEIKRADAAPTVSIFPPSS |
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